近年来,虾肝肠胞虫(Enterocytozoonhepatopenaei,EHP)已经在全世界各地的虾养殖场中被检测到,而EHP流行已经对印度、泰国、中国、越南、马来西亚、印度尼西亚等亚洲各国的养殖虾业造成了严重的经济损失。年泰国越南的科学家报道EHP是近几年来引起南美白对虾生长缓慢的主要原因之一。
图:EHP的扫描电镜(来自K.V.Rajendran)
虾肝肠胞虫(EHP),属于真菌界,是一种专性细胞内寄生生物,大小约为0.7μm×1.1μm。
图:感染EHP病害后的虾
EHP可以通过垂直传播途径。有研究发现,在感染EHP的南美白对虾F1代的无节幼体、蚤状幼体中均能检测到EHP的存在。EHP可以直接通过养殖水体在对虾中直接水平传播。虾经口摄食寄生EHP的死虾/病虾、虾粪便、鲜活饵料(比如目前已有研究显示卤虫可携带EHP)或环境中的孢子体而感染。
EHP主要富集对虾的肠道及肝胰腺。EHP富集主要依次存在于虾肝胰腺;心脏、肠道;血淋巴、鳃;腹尾肌中。
EHP主要影响虾的长速,导致对虾生长缓慢,参差,料比高,继发感染可引发死亡。对虾感染EHP后不表现出明显的疾病症状,摄食正常,肠胃充满食物,不出现大批死亡,严重时肠道发炎,肝胰腺萎缩,虾壳发软,颜色变深或变浅。EHP感染可导致虾免疫力降低,继而由水体中的条件致病菌引起继发感染,出现肠炎、组织坏死、红体等多种病症。
光学显微镜检测。光学显微镜下放大倍可观察到豆绿色EHP,需要巧妙的样品处理及较丰富的镜检经验。同时,病理切片可采用Masson染色,EHP呈现品红色。
分子生物学检测。巢式PCR检测基于胞壁蛋白SWP基因序列设计的引物进行SWP-PCR,EHP检测灵敏度和特异性高。实时荧光定量PCR基于小亚基核糖体RNA(SSUrRNA)基因序列设计,已经建立SYBRGreenI和TaqMan检测方法。实时荧光定量PCR检测一般在2h内可完成。年泰国学者建立了检测EHPSSUrRNA基因的环介导等温扩增(LAMP)技术。年印度学者建立了实时定量LAMP检测方法。年印度学者建立了使用SYBRGreenI染料的可视化LAMP检测方法。
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